Высокий уровень агрегатов тромбоцитов в крови у пациентов с C19

budetlyanin108 — 15.12.2021

Кстати Др. Фарид Джалали MD давно обратил внимание на эту активность агрегатов тромбоцитов при умеренном течении болезни, в частности он пишет: «Все случаи легкой, средней и тяжелой степени имели АНАЛОГИЧНУЮ тяжелую активацию тромбоцитов. Это согласуется с нашей работой. Это позволяет предположить, что активация тромбоцитов является отличительной чертой C19 и, в зависимости от реакции хозяина, может исчезнуть (умеренно) через 1-2 недели или перейти в ОРДС. Само собой разумеется, что всякий раз, когда у вас серьезная активация тромбоцитов, продолжающаяся 1-2-3 недели, высвобождение медиаторов тромбоцитов будет проблемой. Среди них высвобождение 5HT из тромбоцитов может привести к ОРДС, шоку, почечной недостаточности, нарушению ГЭБ, лихорадке, гиперпноэ, диарее и т. Д.»
Интересно, что СИОЗС полезны, если высвобождение 5HT является механизмом.
Др. Фарид отмечает, что первоначально кажется, что вирусный ORF3a встроен в клетки-хозяева, аномальный транспорт кальция через ORF3a, экстернализация PS, а остальное устанавливается позже. При тяжелом заболевании он трансформируется в активацию тромбоцитов, управляемую иммунным комплексом. Подобен HIT, за исключением того, что он вызван гепарином.
Я рискну сказать, что пациенты с очень низким или нормальным уровнем D-димера при тяжелой форме C19 - это пациенты с (хорошо описанным) остановленным + нарушенным фибринолизом, и поэтому они находятся в гораздо худшей ситуации, чем пациенты с чрезмерно активным фибринолизом (противодействие тромбоцитам). (агрегаты) — продолжает Др. Фарид. И через 72 часа после начала антагонизма с 5HT-2 вы увидите того же человека с D-димером > 20 (в основном через крышу, необнаружимо высоко), если вы поймаете его вовремя. То есть восстановился фибринолиз, что является хорошим прогностическим признаком в отличие от того, что проповедуют все остальные (высокий D-димер, плохо). Если у пациента есть факторы риска, обычно связанные с тяжелым прогрессированием заболевания, то необходима профилактическая терапия (mAb, FLV, профилактический Lovenox).
В общем мы приходим к идеи, что нужны блокаторы серотониновых рецепторов 5НТ2, 5НТ3 такие как  миртазапин.

А теперь работа:

Характерной клинической особенностью C19 является частая встречаемость тромбозов микрососудов. Фактически, отчеты о вскрытии C19 показали широко распространенную тромботическую микроангиопатию, характеризующуюся обширными диффузными микротромбами в периферических капиллярах и артериолах легких, сердца и других органов, что приводит к полиорганной недостаточности. Однако основной процесс микрососудистого тромбоза, ассоциированного с C19, остается неуловимым из-за отсутствия инструментов для детального статистического исследования агрегации тромбоцитов (то есть инициирования образования микротромбов). Здесь мы сообщаем о ландшафте циркулирующих агрегатов тромбоцитов в C19, полученном с помощью массивного профилирования на основе изображений отдельных клеток и временного мониторинга крови пациентов с C19 ( n = 110). Удивительно, но наш анализ данных большого изображения показывает аномальное присутствие избыточных агрегатов тромбоцитов почти у 90% всех пациентов с C19. Кроме того, результаты указывают на тесную связь между концентрацией агрегатов тромбоцитов и серьезностью, смертностью, респираторным состоянием и уровнем эндотелиальной дисфункции сосудов у пациентов с C19

...тестирование D-димера, еще одна широко используемая диагностика, обычно используется для оценки присутствия тромбов путем измерения поперечно-сшитых мономеров фибрина (называемых D-димерами), образующихся при разложении тромбов в результате фибринолиза 34 . Сообщается, что тестирование D-димера полезно для оценки тяжести C19, поскольку повышенный уровень D-димеров (> 1 мкг / мл) при поступлении связан с повышенным риском как необходимой механической вентиляции легких, так и смерти из-за осложнения 1 ,3 , 9 , 12 , 35 , 36 . Однако тестирование D-димера не исследует активность тромбоцитов in vivo и не чувствительно к микрососудистому тромбозу, включая ТМА (если он не становится тяжелым) 37 . Медицинские методы визуализации, такие как компьютерная томография (КТ), магнитно-резонансная томография (МРТ) и УЗИ, могут напрямую идентифицировать тромбы в организме, но не имеют достаточного пространственного разрешения для распознавания циркулирующих агрегатов тромбоцитов и микротромбов 38. Наконец, патологоанатомическое исследование может напрямую идентифицировать микротромбы, но применимо только к мертвым пациентам. На сегодняшний день, статистический морфометрического понимание агрегации тромбоцитов были недоступны , и , следовательно , упускать из виду, как оптическая микроскопия (с высоким содержанием , но низкой пропускной инструмент) был основным методом , используемым для изучения агрегации тромбоцитов в деталях до сих пор 26 , 32 .

В этой статье, чтобы лучше понять переходный процесс образования микротромбов при C19, мы получили картину циркулирующих агрегатов тромбоцитов с помощью массивного профилирования на основе изображений отдельных клеток и временного мониторинга крови пациентов с C19. Как показано на рис.  1a , наш метод анализа, основанного на данных, состоит из: (i) взятия крови (1 мл) у пациентов с C19 (дополнительные данные  1 ); (ii) подготовка образца путем выделения тромбоцитов и агрегатов тромбоцитов из крови; (iii) высокопроизводительная визуализация в ярком поле без размытия большой популяции ( n  = 25000) отдельных тромбоцитов и агрегатов тромбоцитов (включая агрегаты тромбоцитов и тромбоцитов и агрегаты тромбоцитов и лейкоцитов 39) В образцах крови, по оптическим частотным разделением каналов мультиплексированием (FDM) микроскопии 32 по гидродинамической фокусировки Микрожидкостных чипов 40 , 41 (фиг.  1b, с , Дополнительный рис.  1подробности см. в разделе «Оптический микроскоп с мультиплексированием с частотным разделением каналов» в разделе «Методы»); и (iv) цифровая обработка изображений и применение различных методов статистического анализа агрегатов тромбоцитов. Получение с помощью микроскопа FDM изображения всех тромбоцитов (например, отдельных тромбоцитов, агрегатов тромбоцитов и тромбоцитов и агрегатов тромбоцитов-лейкоцитов) было инициировано детектированием сигналов флуоресценции от тромбоцитов, меченных анти-CD61-PE (см. «Оптическое мультиплексирование с разделением по частоте» микроскоп »в разделе« Методы »), что выгодно по сравнению с проточными цитометрами 42 , 43, использовавшимися ранее для визуализации.в том, что наш метод может сосредоточиться только на событиях тромбоцитов, избегая потребления его пропускной способностью не тромбоцитарными событиями. Получение изображений и клинические лабораторные исследования выполнялись с частотой 3-5 раз в неделю для каждого госпитализированного пациента, чтобы наблюдать временные изменения в популяции и распределении агрегатов тромбоцитов по размеру во время его / ее госпитализации (дополнительные данные  2 ). На рисунке  1d показана библиотека типичных изображений в светлом поле (67 × 67 пикселей / изображение) отдельных тромбоцитов и агрегатов тромбоцитов, текущих с высокой скоростью 1 м / с, полученных в поле зрения 53,6 мкм × 53,6 мкм с помощью пространственное разрешение 0,8 мкм (Дополнительный рис.  2). Как показано на рисунке, способность нашего подхода к непосредственному отображению и разрешению отдельных тромбоцитов, агрегатов тромбоцитов-тромбоцитов, агрегатов тромбоцитов-лейкоцитов и других неважных компонентов (например, остаточных эритроцитов, лейкоцитов и клеточного мусора) сделала возможным чтобы различать их с гораздо более высокой точностью, чем традиционная проточная цитометрия 23 , 24 , 25 , 26 (особенно при различении отдельных тромбоцитов и небольших агрегатов тромбоцитов). Важно отметить, что эта большая база данных изображений агрегатов тромбоцитов позволила ранее невозможное применение передовых вычислительных инструментов 31 , 44, которые, как мы продемонстрировали здесь, обеспечили уникальные и проницательные аналитические результаты.

 ...мы исследовали влияние половых различий и лейкоцитов. В частности, на рис.  4а показана более высокая концентрация агрегатов тромбоцитов у пациентов мужского пола ( n  = 73), чем у пациентов женского пола ( n  = 37), хотя их статистическая значимость не очень высока, что согласуется с более ранними сообщениями о том, что пациенты мужского пола более подвержены к поступлению в отделение интенсивной терапии и смерти, чем пациенты женского пола 48 . Кроме того, способность нашего метода к высокому разрешению агрегатов тромбоцитов и применению морфометрического анализа к их изображениям позволила идентифицировать присутствие лейкоцитов. Рис.  4б, впоказывают, что наличие лейкоцитов в агрегатах тромбоцитов связано с тяжестью и смертностью C19 соответственно, что также согласуется с предыдущими сообщениями о гиперактивности лейкоцитов при C19 28 , 29 , 30 , 35 . На рис.  4d, e показаны ROC-кривые концентрации агрегатов тромбоцитов по отношению к контролю, соответствующие данным, показанным на рис.  4b, c , соответственно. AUC на этих кривых ROC указывают на превосходную производительность концентрации агрегатов тромбоцитов, содержащих лейкоциты, при оценке активности тромбоцитов-лейкоцитов, связанной с C19

Для дальнейшего изучения значимых факторов, объясняющих концентрацию агрегатов тромбоцитов, мы провели многомерный регрессионный анализ (программное обеспечение SPSS, версия 25, IBM), используя группу маркеров сосудистого эндотелия (FVIII, TM, VWF: RCo), группу маркеров свертывания / фибринолиза. (D-димер, FDP, TAT, PT-INR) и группа других маркеров, имеющих сильную корреляцию с концентрацией агрегатов тромбоцитов в день наивысшей концентрации (WBC, респираторная тяжесть, PLT, LD, ALT, SpO 2 , выживаемость , пол) в качестве потенциальных объясняющих факторов (дополнительные данные  4). В результате анализ идентифицировал FVIII, PLT, WBC, PT-INR и респираторную тяжесть как важные предикторы концентрации агрегатов тромбоцитов в день наивысшей концентрации. Дальнейший многомерный регрессионный анализ с использованием этих параметров выявил респираторную тяжесть ( p  = 0,009) и фактор VIII ( p  = 0,016) как наиболее значимые предикторы концентрации агрегатов тромбоцитов в день наивысшей концентрации.

Затем, поскольку более ранние отчеты показывают начало тромбоза, связанного с C19 даже при низких уровнях D-димера 4 , мы исследовали случаи пациентов с уровнями D-димера ниже референсного уровня ≤1 мкг / мл, что составляет 39,1% от всех Пациенты с C19 (n = 110). Как показано на фиг.  5b , очевидны значительные уровни концентраций агрегатов тромбоцитов. Кроме того, как показано на рис.  5c , корреляция между тяжестью состояния пациентов и концентрацией агрегатов тромбоцитов также сохраняется и аналогична соотношению, показанному на рис.  3a.хотя разница между пациентами с легкой и средней степенью не очень велика, что разумно, поскольку их медицинские условия (как без ИВЛ, так и без ЭКМО) схожи. Рисунок также показывает, что избыточные агрегаты тромбоцитов были обнаружены у 76,7% пациентов с уровнем D-димера ≤1 мкг / мл (подробности см. В разделе «Статистический анализ» в разделе «Методы»). Эти результаты могут свидетельствовать о наличии существенного риска микроваскулярных тромботических заболеваний, который не может быть обнаружен с помощью теста на D-димер. Другими словами, тест на D-димер в основном оценивает свертываемость крови путем измерения D-димеров, которые образуются либо на последней стадии тромбообразования (т.е. перекрестное сшивание), либо после деградации тромба 34 и, как известно, нечувствительны к тромбозу микрососудов. , в том числе ТМА37 , тогда как наш метод характеризует инициирование образования микротромбов и деградацию микротромбов 17 , 18 , 19 , 20 . Последний метод, следовательно, более чувствителен с высоким разрешением к гиперактивности тромбоцитов, что является предполагаемым механизмом широко распространенного образования микротромбов 2 , 45 . Кроме того, тот факт, что был идентифицирован только один тяжелый случай с низким уровнем D-димера, как показано на рис.  5c, можно объяснить, признав, что тест на D-димер обычно нечувствителен к ТМА, как упомянуто выше, но может обнаружить его, если состояние здоровья пациентов становится тяжелым 50. Другими словами, корреляция между уровнем D-димера и концентрацией агрегатов тромбоцитов на рис.  5а действительна для случаев от средней до тяжелой, но не значима для случаев от легкой до умеренной. Наконец, как показано на рис.  5d , большое значение AUC кривой ROC концентрации агрегатов тромбоцитов с низким уровнем D-димера ≤1 мкг / мл по отношению к контролю указывает на высокую эффективность нашего метода при оценке степени тяжести C19 даже при низком уровне D-димера.

наши результаты (рис.  3a - рис.  3c ) также подтверждают недавно предложенный механизм, в котором тромбоциты гиперактивны во время C19, не только через васкулит, но также через прямое взаимодействие SC0V-2 с тромбоцитами 47 , что может объяснить аномальное присутствие избыточных агрегатов тромбоцитов, обнаруженных почти у 90% всех пациентов с C19 в нашем исследовании. Наконец, на основании более ранних сообщений о том, что легкие являются основным местом биогенеза тромбоцитов 52 и развивают широко распространенные микротромбы у пациентов с тяжелой формой C19 3, можно предположить, что одновременная активация тромбоцитов и эндотелиальных клеток в легких может быть тесно связана с ухудшением респираторных заболеваний у пациентов с C19, а антитромбоцитарная терапия может быть эффективной для оксигенации артериальной крови и улучшения клинических исходов при тяжелой форме C-19. пациенты 53 .

Наши результаты показывают, что измерение концентрации и распределения циркулирующих агрегатов тромбоцитов является потенциально эффективным подходом к оценке потенциального риска образования микротромбов, состояния, которое можно проверить только при патологоанатомическом исследовании. Фактически, существует ряд отчетов о вскрытиях, показывающих, что основной причиной смерти пациентов, умерших от пневмонии C19, была дыхательная недостаточность из-за диффузного альвеолярного повреждения с тяжелым застоем капилляров, вызванным микротромбами 10 , 18 . Сильная корреляция между концентрацией агрегатов тромбоцитов и тяжестью введения кислорода и уровнями SpO 2 (рис.  5a и  6a, b)) предполагает способность нашего метода обнаруживать предшественников широко распространенного образования микротромбов. Кроме того, в нашем исследовании у пациентов с C19, у которых не был диагностирован тромбоз, могли развиться микротромбы, которые были слишком малы для обнаружения с помощью медицинских изображений (например, КТ и МРТ), но были идентифицированы нашим методом, как показано на рис.  3a. c . Фактически, метаанализ тромбоза, связанного с C19, показал, что частота венозной тромбоэмболии значительно различалась в зависимости от того, проводился ли скрининг-тест 54 . Возможно, что в нашем клиническом диагнозе была упущена частота тромбоза, что может объяснить несоответствие между тяжелыми случаями и подтвержденным началом тромбоза на рис.  6а . Наконец, рис.  5cуказывает на то, что наш метод чувствителен к активности тромбоцитов как потенциальному предшественнику образования микротромбов при микрососудистом тромбозе, связанном с C19, в то время как тест на D-димер нечувствителен к нему, если только серьезность состояния здоровья пациента не высока. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы напрямую проверить связь между концентрацией агрегатов тромбоцитов и риском микроваскулярного тромбоза, например, путем сравнения результатов нашего метода и аутопсий.

Причину, по которой избыточные агрегаты тромбоцитов не были обнаружены у оставшихся 12,7% пациентов с C19, можно объяснить двумя факторами. Во-первых, частота измерений у пациентов с легкой и средней степенью тяжести была намного ниже, чем у пациентов с тяжелой формой, что привело к более низкой точности определения оптимального времени для измерения концентрации агрегатов тромбоцитов (т. Е. Дня максимальной концентрации) для пациенты легкой и средней степени тяжести. Фактически, среднее количество измерений на одного пациента было 1,9 (легкое), 2,6 (умеренное) и 7,3 (тяжелое) раз. Тот факт, что высокий AUC на кривой ROC концентрации агрегатов тромбоцитов в первый день измерения достигает 0,9 (как показано на рис.  3e).) указывает на то, что как чувствительность, так и специфичность нашего метода высоки, несмотря на разовые измерения. Это означает, что низкая частота измерений ответственна за более низкую концентрацию измеряемых агрегатов тромбоцитов. Во-вторых, почти все пациенты с C19 получали лечение антикоагулянтами на основе гепарина, что могло привести к общему изменению концентрации агрегатов тромбоцитов. Следовательно, ожидается, что более частые измерения без влияния антикоагулянтной терапии (например, с использованием моделей на животных) улучшат временное разрешение профилирования агрегатов тромбоцитов на основе изображений при оценке различной степени тяжести пациентов с C19 и, следовательно, улучшат точность графиков. , тренды и корреляции на рис. 3a – c , 4a – c и 5b – c.

Полностью здесь: https://www.nature.com/articles/s41467-021-27378-2

Примечание: Все сокращение, замены и др. выполнены автором блога и не имеют никакого отношения к публикациям. Сделано это по причине цензуры в некоторых соцсетях, которые борются с любым упоминаем ранней терапии и соответствующих лекарств.

Отказ от ответственности: я не защищаю читателей, употребляющих иве или какие-либо другие препараты. Я не врач, а биохимик по образованию и никому не даю медицинских советов. Прежде чем принимать какие-либо лекарства, всегда консультируйтесь с лечащим врачом, которому доверяете.

Подписывайтесь на мою страницу, всегда последние РКИ, КИ, обзор мировой прессы, статьи и рекомендации о передовых методах лечения К19 : https://www.facebook.com/veniamin.zaycev/

Здесь собрано все, что будет вам интересно, все объяснено в закрепленном посте, там же есть и схема-таблица с алгоритмом и применении иве:
https://www.facebook.com/ashominfo

Группа в фб «Так победим!» все вопросы по иве и ранней терапии:
https://www.facebook.com/groups/293522279068895

Телеграм-канал «Так победим!» на случай потери связи, там публикуется то, что идет в ЖЖ и не всегда идет в ФБ:
https://t.me/takpobedimsvz

Чат по иве в телеграме:
https://t.me/takpobedi

ЖЖ: https://budetlyanin108.livejournal.com/

И мы продолжаем акцию поддержки замечательного доктора, профессора Поля Марика!

РУБРИКАТОР чата Телеграм-канала «Так победим!»

Врачи, а не администраторы, должны лечить пациентов. Борьба Доктора Поля Марика [Так победим!]

ivermec.space

Сохранено

</>

Высокий уровень агрегатов тромбоцитов в крови у пациентов с C19

Кстати Др. Фарид Джалали MD давно обратил внимание на эту активность агрегатов тромбоцитов при умеренном течении болезни, в частности он пишет: «Все случаи легкой, средней и тяжелой степени имели АНАЛОГИЧНУЮ тяжелую активацию тромбоцитов. Это согласуется с нашей работой. Это позволяет ...

Читать полностью

Источник

Оставить комментарий

Популярные посты:

hadrianus

Скупка швейцарских часов: как превратить престиж в ликвидный актив быстро и безопасно

masy_vibes

Про книги за три месяца

tytgrom

6 апреля

antisemit_ru

Тигр и лев.

berg_man

Фальшь, мироточения и правда, войны? Васька слушает, да ест...

konstantinus_a

"Циркон" и цирконий, или Тем временем в России

sergeytsvetkov

«А работа была не из легких»

merinainen

Кабанья тропа.

nasedkin

Фото дня

• Ранее
• Архив