Репликационно-компетентный вирус обнаружен в крови смертельного случая C0 19

Сначала описание самого исследования, потом комментарий, в конце резюме.
Справочная информация: SC0V-2 поражает респираторные ткани, а в некоторых случаях компетентный к репликации вирус обнаруживался во внелегочных тканях, включая мозг ( 1 ). Предполагается распространение вирусемии, часто сообщается об обнаружении вирусной РНК в крови ( 2 ). Однако выделение репликационно-компетентного вируса из крови ранее не было продемонстрировано ( 3 , 4 ).
Цель: подтвердить виремию в смертельном случае COVID-19, когда последовательность вируса в крови и тканях совпадает.
История болезни: 76-летняя женщина с синдромом Тернера в анамнезе, выраженной деменцией и тяжелым аортальным стенозом была госпитализирована осенью 2020 года в общественную больницу с новой одышкой, гипоксией и тахикардией в доме престарелых пациента на дому. Ее частота сердечных сокращений составляла 120 ударов в минуту, частота дыхания - 30 вдохов в минуту, а периферическая сатурация кислорода - 84% при двухуровневом положительном давлении в дыхательных путях. Рентгенограмма грудной клетки выявила двусторонние инфильтраты, а мазок из носоглотки оказался положительным на SARS-CoV-2 по данным полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой. Ей потребовалась инвазивная искусственная вентиляция легких, и ее лечили дексаметазоном, ремдесивиром, эмпирическими антибиотиками и вазопрессорами, в результате чего у нее развилась олигурическая почечная недостаточность и лактоацидоз. Учитывая критическое заболевание пациентки и ее пожелания в конце жизни, семья приняла меры по обеспечению комфорта. Она была экстубирована и умерла через 1 день после госпитализации.
Ближайшие родственники согласились на вскрытие и были направлены в Клинический центр Национального института здравоохранения (NIH) в Бетесде, штат Мэриленд, для аутопсического исследования на наличие COVID-19 ( 1 ). Предсмертную кровь, взятую в момент смерти, собирали в пробирки с гепарином и ЭДТА. Плазму выделяли и хранили при -80°С. РНК SARS-CoV-2 и субгеномная РНК, свидетельствующие о недавней репликации вируса, были обнаружены в плазме, легких, сердце и некоторых дополнительных тканях, а SARS-CoV-2 был обнаружен с помощью культуры клеток Vero E6 в легких и сердце, но не в плазме, как сообщалось ранее ( 1 ). Вторая попытка выделить вирус из плазмы с использованием модифицированной линии клеток Vero, стабильно экспрессирующей человеческую трансмембранную протеазу серин 2 и ангиотензинпревращающий фермент 2, оказалась успешной. Пороговые значения цикла субгеномной РНК-полимеразной цепной реакции снизились с 32,51 (3,48 × 10 4 копий РНК/мл) в исходном образце плазмы до 21,93 (1,14 × 10 9 копий РНК/мл) в супернатанте клеточной культуры через 6 дней. Цитопатический эффект наблюдался в 2 из 2 повторов, культивированных с неразбавленной плазмой, и в 1 из 2 повторов, культивированных с разведением плазмы 1:10.
Полноразмерное геномное секвенирование образцов до- и поствирусной культуры плазмы, легких и сердца продемонстрировало сходство последовательностей более чем на 99% с множественными консервативными мутациями по сравнению с эталонной последовательностью WA1, за исключением 3 синонимичных и 1 несинонимической мутации, присутствующих у 45% до 62 % прочтений в образце плазмы поствирусной культуры ( рис. ).

Фигура. Результаты секвенирования первичных образцов и супернатантов клеточных культур.
NSP = неструктурный белок; UTR = непереведенный регион. Вершина. Репрезентативная схема генома SARS-CoV-2. Из-за низкого ввода не удалось создать полноразмерный контиг для исходных образцов плазмы и легких. Расположение пробелов в последовательностях показано зелеными полосами с диагональными линиями для образца плазмы и сплошными фиолетовыми полосами для образца легких. Нижний. Синонимические и несинонимичные мутации, присутствующие в последовательности SARS-CoV-2 из плазмы, культуральном изоляте из плазмы, легких, клеточном культуральном изоляте из легких и клеточном культуральном изоляте из сердца, полученных с помощью короткого секвенирования и со ссылкой на геном SARS-CoV-2 2019-nCoV/USA-WA1/2020 (MN985325.1). Библиотеки были созданы с использованием набора Illumina Ligation Prep, секвенированного на приборе MiSeq (Illumina). Образец аутопсийной плазмы перед секвенированием был обогащен гибридным вирусом захвата с использованием панели myBaits Expert Virus SARS-CoV-2 (Arbor Biosciences). Значения представляют альтернативный вариант процентного чтения.
* Дополнительные мутации присутствуют в культуральном изоляте из образцов плазмы.
Несколько групп сообщили об обнаружении вирусной РНК в крови на ранних стадиях заболевания COVID-19, которая обычно становится неопределяемой в течение 2 недель после начала заболевания ( 2 ); однако предыдущие попытки выделить вирус из крови оказались безуспешными ( 3 , 4 ). Парадокс обнаружения репликационно-компетентного вируса во внелегочных тканях, но не в крови пациентов с COVID-19, еще предстоит объяснить. Сообщаемый здесь пациент был одним из 44 вскрытий, проведенных в НИЗ в течение первого года пандемии, ранее описанных в совокупности ( 1 ); мы обнаружили РНК SARS-CoV-2 в плазме 12 пациентов. У этого пациента был самый высокий уровень РНК SARS-CoV-2 в плазме - 1,2 × 10 5 копий гена/мл, среди самых высоких уровней РНК SARS-CoV-2 и субгеномной РНК в других тканях, и он был одним из трех пациентов без ответ антител IgM или IgG на шипы SARS-CoV-2 или белки нуклеокапсида ( 1 , 5 ). Мы попытались культивировать вирусную плазму с использованием нашей модифицированной линии клеток Vero у 7 дополнительных пациентов (возраст от 30 до 53 лет, образцы от 2 до 25 дней от появления симптомов) с РНКемией SARS-CoV-2 в диапазоне от 7,8 × 10 3 до 9,5 × 10 4 копии гена/мл; все были отрицательными.
Обсуждение: Наш случай доказывает, что способный к репликации SARS-CoV-2 может перемещаться в крови во время COVID-19 и семенных тканях по всему организму. Использование пермиссивной клеточной линии Vero повысило чувствительность обнаружения SARS-CoV-2 в плазме нашего пациента, как и использование плазмы тяжелобольного, но серонегативного пациента. Культура клеток вызывала незначительную вариабельность последовательности SARS-CoV-2, что согласуется с известными эффектами культуры клеток Vero E6, но в целом один и тот же изолят был выделен до и после культивирования из легких, плазмы и сердца этого пациента. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить последствия наших результатов для людей, инфицированных вариантами SARS-CoV-2, людей с легким заболеванием, людей, недавно вакцинированных, или людей с ослабленным иммунитетом после естественного заражения или вакцинации.
По поводу лечения и того чем ее лечили я промолчу, речь о
другом.
Это демонстрирует, что SARS-CoV-2 может циркулировать и
распространяться за пределы дыхательной системы даже при отсутствии
обнаруживаемых антител. Это предполагает более инвазивное поведение
вируса, чем предполагалось ранее.
SARS-CoV-2 может распространяться в крови во время COVID-19 и
распространяться в тканях организма.
Такое широкое распространение вызывает тревогу по поводу
долгосрочных последствий COVID-19 даже у пациентов, у которых
изначально наблюдаются легкие симптомы. Это было обнаружено с
помощью высокочувствительной клеточной линии Vero, которая
обнаружила вирус в плазме тяжелобольного пациента до того, как его
иммунная система выработала обнаруживаемые антитела.
Что это значит?
SARS-CoV-2 может незаметно обходить раннюю иммунологическую защиту
организма, незаметно проникая в органы, выходящие за пределы
дыхательной системы. Такое скрытое распространение происходит до
того, как иммунная система полностью активизирует выработку
антител, что дает вирусу критически важную возможность для
распространения и нанесения повреждения многим органам. Такое
широкое распространение может привести к полиорганной инфекции и
усугубить тяжесть заболевания, вызывая сложные системные
реакции.
Что касается: выделение одного и того же вирусного штамма из разных
тканей - легких, плазмы и сердца - указывает на значительную
адаптивность вируса. Эта адаптивность предполагает, что SARS-CoV-2
способен не просто выживать, но и процветать в различных тканевых
средах.
Такая устойчивость вируса позволяет ему инфицировать различные
органы, выходя далеко за пределы первоначальных точек
проникновения. Эта характеристика способствует широкому спектру
симптомов и осложнений, наблюдаемых у пациентов с COVID-19, в том
числе затрагивающих нереспираторные системы.
Решение: Необходимы более комплексные стратегии лечения. Особенно
на ранних стадиях заражения. То, о чем мы говорим на протяжении 4
лет! Но кому-то абсолютно не выгодно лечить больных и заниматься
профилактикой.
Всё, что вам нужно знать собрано по ссылкам ниже. Всем
здоровья!
Спасибо всем, кто находит этот пост полезным. Подпишитесь на т/к «Так победим! Статьи»
Примечание: Все сокращение, замены и др. выполнены автором блога и не имеют никакого отношения к публикациям.(обычно в начале публикации и в заголовке). Сделано это по причине цензуры в некоторых соцсетях, которые борются с любым упоминаем ранней терапии и соответствующих лекарств.(в них идет скрин из т/к)
Отказ от ответственности: я не защищаю читателей, употребляющих иве или какие-либо другие препараты. Я не врач, а биохимик по образованию и никому не даю медицинских советов. Прежде чем принимать какие-либо лекарства, всегда консультируйтесь с лечащим врачом, которому доверяете.
ПОМНИТЕ. Вы находитесь под защитой Нюрнбергского кодекса и Хельсинской декларации. Хельсинкская декларация делает центральным документом этической исследовательской деятельности информированное согласие. Декларация определяет не только приемлемость известных и исследованных методов лечения, но принципы лечения больного альтернативными методами, к примеру, параграф 37 призван регулировать случаи, «когда не существует проверенного профилактического, диагностического или терапевтического метода. Когда существующие методы оказываются неэффективными, врач, получив обоснованное согласие пациента, должен иметь право применять непроверенные или новые профилактические, диагностические и терапевтические меры, если, по его мнению, они дают надежду на спасение жизни, восстановление здоровья или могут облегчить страдания. По мере возможности такие меры должны быть исследованы на предмет их безопасности и эффективности. Во всех случаях всю новую информацию следует регистрировать и, при необходимости, публиковать».
Полный текст ХД: https://budetlyanin108.livejournal.com/3489319.html
Подписывайтесь на мою страницу, всегда последние РКИ, КИ, обзор мировой прессы, статьи и рекомендации о передовых методах лечения К19 : https://www.facebook.com/veniamin.zaycev/
Здесь собрано все, что будет вам интересно, все объяснено в
закрепленном посте, там же есть и схема-таблица с алгоритмом и
применении иве:
https://www.facebook.com/ashominfo
Группа в фб «Так победим!» все вопросы по иве и ранней
терапии:
https://www.facebook.com/groups/293522279068895
Телеграм-канал «Так победим!» на случай потери связи, там
публикуется то, что идет в ЖЖ и не всегда идет в ФБ:
https://t.me/takpobedimsvz
Чат по иве в телеграме:
https://t.me/takpobedi
ЖЖ: https://budetlyanin108.livejournal.com/
"Книга отзывов"
часть 1: https://budetlyanin108.livejournal.com/3118230.html
часть 2: https://budetlyanin108.livejournal.com/3118949.html
часть 3: https://budetlyanin108.livejournal.com/3211902.html
часть 4: https://budetlyanin108.livejournal.com/3417765.html
Ссылки по детоксикации спайк-белка:
https://budetlyanin108.livejournal.com/3144742.html
https://budetlyanin108.livejournal.com/3260643.html
https://budetlyanin108.livejournal.com/3596796.html
Детокс аутофагией:
https://budetlyanin108.livejournal.com/3613550.html
Назальные спреи
https://budetlyanin108.livejournal.com/3612201.html
РУБРИКАТОР чата Телеграм-канала «Так победим!»
Обзор противоопухолевых свойств перепрофилированных препаратов
В связи с тем, что участились просьбы дать ссылки на научные статьи и исследования по применению тех или иных перепрофилированных препаратов против рака, сделал этот пост на основе публикаций в моем ЖЖ. Возможно всё не удастся втиснуть в один пост из-за ограничений по количеству знаков (лимит 80К знаков), но можно будет воспользоваться «поиском» у меня в ЖЖ по ключевым словам для получения дополнительной информации.
https://budetlyanin108.livejournal.com/3655521.html