Ингибирующие эффекты специфической комбинации природных соединений против
budetlyanin108 — 31.01.2022
Наше более раннее исследование показало, что специфическая комбинация соединений растительного происхождения может ингибировать связывание SC0V-2 с его рецептором ACE2 и контролировать ключевые клеточные механизмы вирусной инфекционности. В этом исследовании мы оценили эффективность определенной смеси растительных экстрактов и питательных микроэлементов против исходного SC0V-2 и его вариантов альфа, бета, гамма, дельта, каппа и мю. Композиция, содержащая витамин С, N-ацетилцистеин, ресвератрол, теафлавин, куркумин, кверцетин, нарингенин, байкалин и экстракт брокколи продемонстрировала высочайшую эффективность, ингибируя связывание рецептор-связывающего домена (RBD) SC0V-2 с его клеточным рецептором ACE2 на 90%. В пробирке воздействие этой формулы на испытуемые псевдотипированные варианты в течение 1 ч до или одновременно с введением в клетки легких человека приводило к 60% ингибированию их проникновения в клетки. Кроме того, эта композиция значительно ингибировала другие клеточные механизмы вирусной инфекционности, включая активность вирусного RdRp, фурина и катепсина L. Эти результаты демонстрируют эффективность природных соединений против SC0V-2, включая его мутантные формы, посредством плейотропных механизмов. Наши результаты показывают, что одновременное ингибирование нескольких механизмов вирусной инфекции клеток-хозяев может быть эффективной стратегией предотвращения заражения SC0V-2.
Избранные места:
...Клеточной инфекции SC0V-2 способствуют несколько ферментативных белков хозяина, в том числе трансмембранная протеаза серин 2 (TMPRSS2), фурин, катепсин L, а также РНК-зависимая РНК-полимераза (RdRp), катализирующая размножение вирусной РНК [ 12 ]. РНК-зависимая РНК-полимераза (RdRP) представляет собой консервативный по структуре вирусный фермент, не имеющий гомологов в клетке-хозяине, и поэтому она представляет интерес для разработки селективных ингибиторов в качестве потенциально более безопасной альтернативы для лечения C19 и не влияет на клетки человека-хозяина. белков напрямую [ 13 ].
Применение природных соединений с их широким плейотропным действием дает возможность контролировать несколько механизмов, связанных с инфекцией SC0V-2, с высоким запасом прочности. С момента появления C19 несколько исследований показали эффективность таких соединений в качестве ингибиторов [ 14–17 ]. Наши более ранние исследования также выявили эффективность соединений растительного происхождения в отношении нескольких клеточных механизмов инфекционности SC0V-2 [ 18–20 ].]. В этом исследовании мы оценили эффективность определенной комбинации питательных микроэлементов и растительных экстрактов против недавно появившихся мутантных форм SC0V-2 и активность ключевых ферментов, участвующих в вирусном процессинге в альвеолярных клетках человека. Этот подход направлен на одновременное ингибирование нескольких клеточных механизмов, участвующих в инфекционности SC0V-2, независимо от мутации и/или подтипа, тем самым открывая новые возможности для глобального контроля над пандемией.
...Растительные композиции
Комбинации природных соединений, испытанные в этом исследовании, представлены в Таблице 1 . Исходные растворы этих комбинаций готовили в диметилсульфоксиде (ДМСО) при концентрации 50 мг/мл и хранили при -20 °C до проведения анализа. Для экспериментов исходный раствор разбавляли 1 × фосфатно-солевым буфером (1 × PBS) или буфером, рекомендованным производителем используемого набора (анализы активности ферментов), или соответствующей средой для культивирования клеток (эксперименты на основе клеток) до конечных концентраций. указаны на рисунках.
...Результаты
Подбор наиболее эффективной композиции природных соединений на основе ее ингибирования связывания RBD вируса с рецептором hACE2
Результаты на рис. 1 показывают эффективность различных комбинаций растительных экстрактов и питательных микроэлементов в отношении ингибирования связывания RBD SC0V-2 с эпителиальными клетками легких, сверхэкспрессирующими рецептор ACE2 человека. Все пять композиций проявляли ингибирующее действие на связывание RBD на уровне 50% и выше. Самое высокое ингибирование, т.е. на 90% по сравнению с контролем, было получено при применении MixV в концентрации 10 мкг/мл ( фиг . 1А ). Добавление витамина D или цинка к MixV не усиливало ингибирование связывания RBD с человеческим рецептором ACE2, как показано на фиг.1В .
Влияние MixV на клеточное прикрепление и проникновение SC0V-2 и его псевдотипизированных вариантов
Влияние различных схем применения MixV на прикрепление и проникновение в клетку псевдотипированных вариантов с оболочкой eGFP-luc-spike тестировали с использованием клеток A549/hACE2. Результаты, представленные на рис. 2А , показывают, что воздействие MixV на псевдовирионы до инфицирования ими клеток легких человека было эффективным в снижении проникновения в клетки всех протестированных вариантов SC0V-2. Таким образом, MixV, применяемый в дозе 10 мкг/мл к исходному штамму SC0V-2 и его вариантам Alpha, Beta, Gamma, Delta, Kappa и Mu в течение 1 часа перед их добавлением к клеткам A549/hACE2, приводил к снижению проникновение вируса на 39%, 48% и 42%, 57%, 51%, 39% и 24% соответственно. Рисунок 2Бпоказывает влияние MixV на ингибирование проникновения в клетки тестовых вариантов, когда его применяли одновременно с псевдотипированными вирионами и клетками A549/hACE2. В присутствии MixV в концентрации 10 мкг/мл проникновение в клетку альфа -вирионов ингибировалось на 38%, бета-вирионов на 48% и гамма-вирионов на 41%. Ингибирующий эффект MixV на проникновение исходных вирионов SC0V-2 составил 57%, а вариантов Delta, Kappa и Mu — 64%, 42% и 24% соответственно. Результаты, представленные на рис. 3А , показывают, что MixV, применяемый в дозах 5 и 10 мкг/мл , не влиял на жизнеспособность клеток A549/ hACE2 , а введение витамина D3 отдельно или с цинком не оказывало дополнительного влияния на их выживаемость
...Влияние MixV на вирусную полимеразу RdRp
В нашем исследовании мы также проверили, действует ли MixV за пределами этапов связывания процесса заражения SC0V-2, изучив его влияние на другие важные клеточные механизмы при вирусной инфекции, такие как активность RdRp, которая необходима для репликации вируса. Как показано на фиг. 4A , ферментативная активность рекомбинантного RdRp SC0V-2 значительно ингибировалась на 53% в присутствии MixV при концентрации 10 мкг/ мл . Ни витамин D3, ни цинк не усиливали этот ингибирующий эффект. Сходный ингибирующий эффект MixV на активность RdRp также наблюдался при использовании лизата клеток, сверхэкспрессирующих белок RdRp
Влияние MixV на клеточные протеазы хозяина
Было документально подтверждено, что различные специфические протеазы клеток-хозяев, включая фурин и катепсин L, необходимы для облегчения проникновения SC0V-2 в клетки за счет ферментативного «примирования» шиповидных белков и выхода вируса. В нашем исследовании мы применили бесклеточные анализы для изучения прямого воздействия MixV на активность этих ферментов. Как показано на фиг. 5А , мы наблюдали ингибирование активности фурина на 12% и 34% при применении MixV в дозах 5 и 10 мкг/мл соответственно . Этот ингибирующий эффект MixV дополнительно усиливался в присутствии витамина D, что приводило к ингибированию на 54%. Комбинация MixV с витамином D и цинком еще больше снизила активность фурина на 78%. Как показано на рис. 5В., MixV, хотя и умеренно, также был эффективен в снижении активности катепсина L, участвующего в эндосомальном выходе SC0V-2. В присутствии 10 мкг/мл MixV ферментативная активность катепсина L снижалась на 14%, а добавление витамина D3 не оказывало существенного влияния на ингибирование катепсина L.
Принимая во внимание немедленную доступность и высокий профиль безопасности этих природных соединений, их применение в качестве профилактических мер, например, в качестве дополнения к вак и терапии C19, вполне вероятно.
В то время как все протестированные комбинации питательных веществ (A, B, C, D и E) были эффективны в блокировании связывания RBD с ACE2 примерно на 50%, MixV продемонстрировал самое высокое ингибирование связывания вируса, 90%. Это указывает на то, что здесь может играть роль синергетический или, по крайней мере, аддитивный эффект, не исключая других, например, аллотропных, взаимодействий между соединениями MixV и RBD/ACE2.
В нашем исследовании изучалось ингибирующее действие MixV на клеточную интернализацию как вирионов SC0V-2, так и его мутантных форм с использованием различных схем воздействия этих вирионов на MixV и клетки легких человека. Таким образом, мы инкубировали тестовые вирионы с MixV в течение 1 часа перед их воздействием на клетки и одновременно комбинировали MixV с вирионами и клетками. Результаты показывают, что максимальное ингибирование клеточной трансдукции этими вирионами может быть достигнуто, когда все эти элементы взаимодействуют одновременно. Это означает, что эта смесь влияет на метаболические аспекты взаимодействия клеток и вирионов, а не на сам вирус. Хотя его эффективность в ингибировании интернализации вируса не была специфичной для вируса, MixV, тем не менее, был наиболее эффективным в ингибировании исходных вариантов SC0V-2 и Delta по сравнению с другими мутантными формами.
Помимо ингибирующего действия MixV на клеточное прикрепление и проникновение вирионов SC0V-2, мы также наблюдали, что MixV влияет на клеточные механизмы, участвующие в эндосомальном выходе и размножении вируса, путем снижения активности ферментов, участвующих в вирусном клеточном процессинге. Было показано, что среди протеолитических ферментов, участвующих в этих процессах, активность катепсина L и фурина важна для патогенности SC0V-2 [ 22 , 23 ]. Также было показано, что действие фурина на спайковый белок SC0V-1 необходимо для слияния вирионов с мембранами хозяина, не влияя непосредственно на инфекционность вируса [ 24 ].]. Похоже, что для эффективного контроля и лечения инфекции SC0V-2 может потребоваться одновременное ингибирование нескольких протеаз, чтобы эффективно препятствовать этим патологическим превращениям.
Здесь мы показали, что помимо нарушения связывания вируса с эпителиальными клетками легких, сверхэкспрессирующими hACE2, MixV снижал активность мембранной протеазы фурина и эндосомального катепсина L. Снижение активности этих ферментов наблюдалось при нетоксичных концентрациях MixV. Этот эффект значителен, так как отсутствие дополнительного сайта расщепления фурином на шиповидном белке SC0V-1 оказывает существенное влияние на его инфекционность [ 25 ].
В дополнение к инфекции SC0V-2 потенциальная сигнальная связь между шиповидным белком, фурином и ACE2 подразумевается в возникновении неблагоприятных сердечно-сосудистых событий [ 26 ]. Поскольку эти ферменты также участвуют в различных биохимических путях, отсутствие полного ингибирования при концентрациях MixV, используемых в исследовании, может быть полезным. Мы наблюдали, что витамин D3 и цинк оказывали дополнительное влияние на снижение ферментативной активности фурина, но не катепсина L. Наконец, мы также зафиксировали существенное ингибирование активности вирусного RdRp в этих концентрациях с его последствиями в снижении скорости репликации вируса.
Основываясь на этом исследовании и наших более ранних выводах [ 18 , 19 , 27 ], эта комбинация соединений растительного происхождения и питательных микроэлементов может представлять собой новую стратегию борьбы с SC0V-2, одновременно влияя на несколько аспектов жизненного цикла вируса, включая проникновение вируса и репликацию. Эта стратегия была реализована и в наших более ранних исследованиях, в том числе по человеческому гриппу H1N1, птичьему гриппу H1N5 и др., в основе которых лежал отбор природных компонентов, одновременно воздействующих на ключевые механизмы патологии широкого спектра инфекционных агентов [ 28–31 ].
Наше исследование предполагает, что одновременный контроль ключевых стадий инфекционности SC0V-2 с помощью определенной комбинации растительных и биологически активных соединений может быть эффективным при лечении сложных патологий, таких как при этой вирусной инфекции. В совокупности с недавно полученными клиническими данными о том, что инфузии витамина С могут успешно бороться с C19 даже на поздних стадиях [ 32 ], фитосоединения благодаря их плейотропным биологическим эффектам могут представлять собой новый подход к борьбе с SC0V-2 и его мутантами.
Примечание: Все сокращение, замены и др. выполнены автором блога и не имеют никакого отношения к публикациям. Сделано это по причине цензуры в некоторых соцсетях, которые борются с любым упоминаем ранней терапии и соответствующих лекарств.
Отказ от ответственности: я не защищаю читателей, употребляющих
иве или какие-либо другие препараты. Я не врач, а биохимик по
образованию и никому не даю медицинских советов. Прежде чем
принимать какие-либо лекарства, всегда консультируйтесь с лечащим
врачом, которому доверяете.
Подписывайтесь на мою страницу, всегда последние РКИ, КИ, обзор мировой прессы, статьи и рекомендации о передовых методах лечения К19 : https://www.facebook.com/veniamin.zaycev/
Здесь собрано все, что будет вам интересно, все объяснено в
закрепленном посте, там же есть и схема-таблица с алгоритмом и
применении иве:
https://www.facebook.com/ashominfo
Группа в фб «Так победим!» все вопросы по иве и ранней
терапии:
https://www.facebook.com/groups/293522279068895
Телеграм-канал «Так победим!» на случай потери связи, там
публикуется то, что идет в ЖЖ и не всегда идет в ФБ:
https://t.me/takpobedimsvz
Чат по иве в телеграме:
https://t.me/takpobedi
ЖЖ: https://budetlyanin108.livejournal.com/
И мы продолжаем акцию поддержки замечательного доктора, профессора Поля Марика!
РУБРИКАТОР чата Телеграм-канала «Так победим!»
К чему снится бывший муж 
Просто так 
Природный газ - волны и циклы обновление 
ЮАРцы и ЮАРки 
О "предчувствии гражданской войны" с позиций гражданских реалий 
Нас обрадовали тем, что производство красной икры в России обрушилось 
один из лучших отзывов! 
Трамп выдвинул на должность директора ФБР открытого врага ФБР 
Направление года – Таиланд 
