Наиболее полное исследование ДНК "в" прошло рецензирование. Флуорометрия +
budetlyanin108 — 07.12.2024
Эта статья анализирует, нашумевшую на днях, статью немецких исследователей. Чем она ценна? Тем, что автора приглашали быть рецензентом, но он отказался, чтобы авторов не обвинили в предвзятости.
Ульрике Каммерер, Верена Шульц и Клаус Стегер только что опубликовали сенсационную публикацию в рецензируемом журнале.
Меня пригласили рецензировать эту статью, но я отказался, так как чувствовал, что мое рецензирование будет воспринято как вмешательство в бейсбол. Чтобы это выдержало испытание временем, мы не можем прибегать к бреду мужского клуба, который демонстрируют фаусисты.
Есть несколько аспектов этой статьи, которые стоит рассмотреть подробно. Статья не только улаживает некоторые из методов, обсуждаемых в этой области относительно того, как лучше всего количественно определить ДНК в этих вакцинах, но и трансфицирует клетки HEK вакцинами и демонстрирует, что спайк экспрессируется дольше 7 дней и не остается припаркованным на клеточной мембране. Он упаковывается и попадает в экзосомы и, предположительно, экспортируется по всему телу.
Это важное открытие, поскольку экзосомы выдыхаются и экспортируются на поверхность кожи. Это имеет серьезные последствия для истории выделения. Если эти экзосомы содержат плазмиды, то дело сделано. Это подразумевает передаваемую и потенциально репликационно компетентную ДНК, которая кодирует белок шипа и компоненты SV40. Неясно, будут ли эти плазмиды экспрессировать белок шипа в клетках млекопитающих, поскольку промотор T7 должен быть активен только в бактериальных клетках, но ваш организм загружен бактериями, и бактофекция — это вещь.
У людей также были обнаружены другие плазмиды, кодирующие нуклеокапсидный белок. Взгляните на статью Бека и др., в которой документируется утечка в лаборатории в Сиэтле, которая поразила сотрудников лаборатории и их соседей по дому с плазмидами, экспрессирующими pcDNA3-SARs-CoV-2-N . Эти плазмиды очень похожи на плазмиды Pfizers, полностью содержащие компоненты SV40, но также имеют промотор CMV, который обеспечивает экспрессию нуклеокапсидной плазмиды в клетках млекопитающих (отличающийся от T7, обнаруженного в BNT162b2). Эти плазмиды используются во всем мире, и некоторые из них кодируют спайковый белок и, вероятно, также протекают, как это было в Сиэтле. Никто не обращает внимания на этот риск утечки, несмотря на статью Бека в Сиэтле.
Статья Ульрике касается этого. Это челночные векторы, что является хорошим способом сказать, что это зоонозные плазмиды, которые могут перескакивать между бактериями и линиями клеток млекопитающих и реплицироваться в обеих.
Это эволюционный скачок, который большинство людей не ценят. В конце концов, SV40 был обезьяньим вирусом и обычно не заражает бактерии, но как только вы вырезаете и вставляете самые функциональные его части в плазмиды типа pUC, вы можете заставить эту ДНК реплицироваться в бактериях и клетках млекопитающих, расширяя его эволюционный охват и способы передачи.
Итак, перейдем к сути статьи.
Они количественно определяют внутриклеточный спайковый белок, который становится самым высоким на 5-й день, но все еще выше, чем на 1-й день, на 7-й день после трансфекции. Это рисунок C. Затем на рисунке D они показывают, что экспортируемый из клетки спайковый белок продолжает расти на 7-й день. Этого не должно было произойти. Модель этой системы в PowerPoint заключалась в том, что спайк будет прикреплен к клеточной мембране и останется локализованным в мышечных клетках, которые не делятся, а иммунитет будет вырабатываться в мышцах и исчезать через 48 часов.
Вместо этого клетки HEK превращаются в фабрики по экспорту шипов.
Затем они продемонстрировали, что эти шиповидные белки на самом деле находятся в экзосомах.
Это должно вызвать тревогу, поскольку механизм биораспределения теперь сложнее, чем простое разбавление LNP. Я бы с удовольствием провел ПЦР некоторых из этих экзосом.
Затем они проводят самое рациональное и всестороннее количественное исследование, которое я когда-либо видел.
Они берут 3 разных набора для флуорометрии (PicoGreen, Qubit и AccuBlue) и измеряют концентрацию ДНК до и после использования РНКазы А. РНКаза А устраняет РНК, поэтому перекрестные помехи нейтрализуются.
Вспомните, TGA игнорировала работу Konig, поскольку она не использовала RNaseA. Speicher et al действительно использовали RNaseA в своем исследовании в австралийском флаконе, но они пытались игнорировать это, поскольку оно не было рецензировано. На самом деле я рецензировал его в частном порядке. Теперь этот спор улажен и находится в рецензируемой литературе. Он соответствует работе, которая была представлена для публикации другими. Консенсус формируется.
Обратите внимание, что флуорометрия для РНК идет так, как и ожидалось (рисунок A). Помните об этом. Это важная деталь для разоблачения исследования Кайзера и др. На рисунках B и C показано, что у AccuBlu наименьшее перекрестное взаимодействие с РНК (это то, что мы использовали), а у Qubit наибольшее перекрестное взаимодействие (сигнал без РНКазы A - сигнал с РНКазой A). После переваривания РНКазой A сигналы для всех анализов сводятся только к измерению ДНК.
Это то, что мы тоже наблюдаем. Сигнал падает на порядок после RNaseA, но все еще остается выше предела.
Они также продолжают демонстрировать, насколько важно использовать Triton-X-100 для открытия LNP, иначе вы недомерите ДНК. Мы получаем дополнительный импульс, если используем Triton-X-100 и нагреваем до 95°C, но это может привести к распаду РНК.
Меня также атаковали в сети за использование AccuBlu, поскольку этот набор часто считают подделкой Qubit. Эти клоуны из Twitter не уважали то, что я был научным сотрудником в Life Tech, которая разработала Qubit, и у меня были внутренние знания о том, как все эти наборы работают рядом друг с другом, поскольку мы в значительной степени полагались на них для питания секвенаторов SOLiD. Секвенаторы SOLiD должны иметь самые точные измерения ДНК и РНК, поскольку вы должны разбавлять свои образцы до уровней цифровой ПЦР с одной молекулой, и если вы облажаетесь, вы сожжете реакцию эмульсионной ПЦР за 1000 долларов и потенциально запуск секвенирования за 10 000 долларов. И часто библиотеки ДНК представляют собой очень маленькие молекулы и могут содержать димеры праймеров, поэтому понимание того, как эти красители для количественной оценки работают с маленькой ДНК и РНК, имело решающее значение для успеха наших клиентов. Этот секвенатор нового поколения захватил 30% рынка, когда Lifetech приобрела ABI в 2008 году. Поэтому нам пришлось заняться количественным анализом ДНК и РНК, и мы знали параметры, при которых эти инструменты не срабатывают, и не были раскрыты в их маркетинговых материалах.
Но этот демонтаж не помешает арахисовой галерее без пипеток снова передвинуть ворота.
«Ну и что, что это сверх нормы. Это так мало, что клетки его уничтожат!»
Да, клоуны ошибались и в этом. ДНК присутствует после промывки клеток. Так что она внутри клеток, и даже ампликоны 362bp могут быть получены из Spike Figure 3B .
ДНК находится в клетках, и ампликоны размером 362 п.н. могут быть амплифицированы, что позволяет предположить, что она не разрушается клетками, но, вероятно, запускает cGAS-STING.
Квон и др. показывают, как это может привести к раку.
Конечно, это не должно никого из нас удивлять, учитывая, что Министерство здравоохранения и социальных служб США потратило 1 млрд долларов на подкуп СМИ и платных инфлюенсеров, чтобы снизить нерешительность в отношении вакцин. Позор! Держу пари, что эта вечеринка закончится на RFKJr.
А теперь вспомните статью Кайзера, в которой он пытался опровергнуть историю о загрязнении ДНК с помощью некачественных методов.
Появляется все больше статей о загрязнении ДНК
·
15 НОЯБ.
Эти никчемные методы Каммерер и др. отправляют в дровяной сарай. Они не последние, кто попытается провернуть этот трюк. Я видел еще одну статью в обращении, которая пытается провернуть этот трюк.
Одна важная статья, которую я не видел упомянутой в этой работе, это Georgiou et al ., которая демонстрирует, что эти красители флуоресцируют более количественно, когда связаны с длинной ДНК. Как только вы пережевываете 4 мкг длинной ДНК в 4 мкг короткой ДНК с помощью ДНКазы I, сигнал затухает на 70%!!!
Таким образом, измерения Ульрике, скорее всего, составляют всего 30% от реального сигнала.
Таким образом, реальные оценки, скорее всего, составляют 40нг→133нг или в 13,3 раза больше.
Если предположить, что средняя длина фрагмента ДНК составляет 100 пар оснований, то это 1,2 триллиона молекул ДНК, 24 из которых — это усилители SV40 длиной 72 пары оснований, которые воздействуют на ядро в каждой дозе.
И мне кажется, мы не можем кричать достаточно громко.
ВСЕ ВАШИ ПРЕДЫДУЩИЕ ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ДНК НЕ ИМЕЮТ ЗНАЧЕНИЯ, вы, раздражительные регулирующие ракушки!
Это НЕ голая ДНК.
Сколько раз нам нужно вам это повторять?
Истинная причина, по которой вы так хвалите эту технологию мРНК (доставка мРНК с помощью ЛНП, которая в противном случае никогда бы не достигла цели), заключается в том, что она является настоящим троянским конем для загрязняющих веществ.
Если вы запутались в деталях методов, раздел обсуждения заслуживает отдельного прочтения.
Последовательность SV40 не была объявлена и была излишним риском, скрытым от регуляторов. В любой не подкупленной регуляторной среде это вызвало бы ярость регуляторов и привело бы к приостановкам и штрафам. Вместо этого мы имеем регуляторов, играющих скромные роли менеджеров по маркетингу для Pfizer.
Каково это — быть сучкой из Pfizer? Хорошая ли оплата или это просто самый простой способ съехать с катушек сейчас, когда большинство государственных учреждений просто работают из дома после COVID? Я очень надеюсь, что DOGE внимательно рассмотрит этот скандал и наведет порядок. Если вы работаете в FDA и читаете это, сейчас самое время отколоться от безумия и высказаться. Да, вас могут уволить, но вы будете первым человеком, которого наняли в январе с оплачиваемым отпуском. Станьте осведомителем сейчас, иначе это будет преследовать вас вечно.
Вернемся к статье-
Обратите внимание на этот термин Shuttle Vector. Просто подумайте о зоонозной плазмиде, которая имеет тенденцию заражать персонал лаборатории и их соседей по дому в Сиэтле. Эти исследовательские плазмиды должны быть взяты под крыло исследовательского регулирования GOF. Я надеюсь, что новая администрация обратит на это внимание.
Когда галерея арахиса без пипетки декламирует «нефункциональную» утку... отправьте им это
И последствия для пролития
Честно говоря, из таких данных невозможно сделать никакого другого рационального вывода.
Люди, которые этого не видят, либо участвуют в маркетинговой афере на $1 млрд, либо являются партизанскими писаками, которые не понимают, что являются частью крупнейшей в истории операции по массовому самоубийству Jonestown Jab. И, боже, их чрезмерная элитарная виртуозность когда-либо создает мощный культ смерти.
Не забудьте прочитать пост Чакраборти, который просматривал недавние исследования с данными секвенирования в NCBI SRA и обнаружил эти последовательности в крови всех этих участников.
Теперь его можно обнаружить в крови и органоидах Now Found in the Blood and in Organoids
··
25 НОЯБ.
Статья была представлена в июле 2024 года. Так что «проплыть» — это неправильное название. Вы заметите, что в статье нет традиционного языка NERF, который можно увидеть в других статьях, которые заставляют вас воздавать почести «безопасным и эффективным» богам.
Онлайн-ТВ как часть цифровой медиасреды 
Луч солнца золотого 
Продукты разжижающие кровь 
Работа мечты 
Покушение на Шойгу 
Курская битва-2 
Как почистить и ускорить компьютер, ТОП-7 программ и утилит 
Добавим огня в этот пасмурный вечер! 
Краевая конференция кардиологов Кардио плюс. Событие 2025 года. 
