Моделирование вируса денге и неструктурного белка 1 у хозяина и эффекты ИВЕ у

budetlyanin108 — 29.09.2024

Рост заболеваемости лихорадкой денге представляет собой существенную проблему для общественного здравоохранения во всем мире. Не существует одобренных противовирусных препаратов для лечения инфекций денге. Ивермектин, старый противопаразитарный препарат, не оказал никакого влияния на виремию денге, но снизил уровень неструктурного белка денге 1 (NS1) в клиническом исследовании. Это потенциально важно, поскольку NS1 может играть причинную роль в патогенезе тяжелой лихорадки денге. В этом исследовании была создана модель хозяина для характеристики плазменных кинетик вируса денге и NS1 с иммунитетом хозяина и оценены эффекты ивермектина с использованием подхода моделирования фармакокинетики–фармакодинамики (PK–PD) популяции, основанного на двух исследованиях острой лихорадки денге: плацебо-контролируемом исследовании ивермектина у 250 взрослых пациентов и исследовании PK–PD ивермектина у 24 детей. Предложенная модель адекватно описала наблюдаемую фармакокинетику ивермектина, вирусную нагрузку и данные NS1. Вес тела был значимой ковариацией фармакокинетики ивермектина. Мы обнаружили, что ивермектин снижал NS1 с EC 50 67,5 мкг/мл. Моделирование in silico показало, что ивермектин следует вводить в течение 48 ч после начала лихорадки, и что суточная доза 800 мкг/кг может обеспечить существенное снижение NS1. Модель лихорадки денге у хозяина полезна для оценки эффекта препарата при разработке противовирусных препаратов для лихорадки денге.

Денге — это переносимое комарами флавивирусное заболевание, которое в настоящее время распространено более чем в 100 странах мира. Существует четыре серотипа (от денге-1 до денге-4), которые могут вызывать инфекции у людей. Заболеваемость денге резко возросла во всем мире за последние десятилетия. За первые 10 месяцев 2023 года было зарегистрировано более 4,5 миллионов случаев и более 4000 смертей, связанных с денге, в 80 странах/территориях мира. 1 По оценкам ВОЗ, ежегодно происходит 390 миллионов случаев заражения денге, из которых 96 миллионов проявляются клинически. 2 Симптомы денге длятся 2–7 дней у большинства пациентов. У некоторых пациентов, особенно детей, могут развиться опасные для жизни синдромы, такие как геморрагическая лихорадка денге (ГЛД) и шоковый синдром денге (ШСД). По оценкам, 500 000 человек с лихорадкой денге нуждаются в госпитализации из-за предупреждающих признаков или тяжелой формы лихорадки денге, и что денге ежегодно становится причиной около 20 000 смертей. 2 Вторичные инфекции — это последующие новые инфекции лихорадки денге (любого серотипа), которые возникают после излечения первичной инфекции и могут привести к более тяжелому заболеванию, чем первичная инфекция.

Для борьбы с растущим числом инфекций денге в мире предлагается комплексный подход, включающий борьбу с переносчиками, профилактику безопасными и эффективными вакцинами и эффективное лечение острых инфекций. В настоящее время одобренные четырехвалентные вакцины против денге (CYD-TDV и TAK-003) снижают количество инфекций и госпитализаций, особенно у лиц с серопозитивным статусом денге. 3 - 5 В качестве ключевого компонента комплексного подхода противовирусное лечение по-прежнему необходимо для решения высокой неудовлетворенной медицинской потребности у пациентов с инфекциями денге с целью снижения бремени болезни (т. е. заболеваемости, смертности и госпитализации).

На сегодняшний день не существует одобренных противовирусных препаратов для лечения инфекций денге. Было предложено несколько препаратов в качестве кандидатов на повторное использование, включая хлорохин6, балапиравир7 , целгосивир8 , ловастатин10 и ивермектин11 , но рандомизированные плацебо-контролируемые испытания не продемонстрировали эффективности ни с точки зрения снижения вирусной нагрузки, ни с точки зрения улучшения других клинических результатов. Окно лечения для конкретных противовирусных препаратов относительно узкое , поскольку виремия быстро снижается примерно на четвертый или пятый день болезни, совпадая с ростом концентрации антител. Это также время, когда проявляются тяжелые формы заболевания.

Идентификация биомаркеров, которые коррелируют с последующим прогрессированием до тяжелой лихорадки денге, будет очень ценной для разработки лекарств. Неструктурный белок денге 1 (NS1) является потенциальным кандидатом. Этот гликопротеин секретируется в больших количествах инфицированными клетками и обнаруживается в кровотоке пациентов дольше, чем виремия. Есть данные, свидетельствующие о том, что NS1 и антитела против денге NS1 ответственны за патогенез тяжелой лихорадки денге (т. е. DHF/DSS). 12 , 13 Антиген денге NS1 оказывает прямое действие на сосудистый эндотелий и считается основным фактором, вызывающим нарушение целостности монослоя эндотелиальных клеток. Между тем, опосредованное NS1 высвобождение воспалительных цитокинов из иммунных клеток также способствует гиперпроницаемости эндотелия и сосудистой утечке. 14 - 16 Основным патогенезом антител против денге NS1 при тяжелой лихорадке денге является неконтролируемое высвобождение цитокинов. В недавней обзорной статье, обобщающей 10 исследований, проведенных в больницах разных стран, было обнаружено, что большинство этих исследований продемонстрировали положительную корреляцию между высоким уровнем NS1 и тяжестью лихорадки денге (DHF/DSS). 17

Ивермектин подавляет репликацию лихорадки денге in vitro. 18 , 19 В рандомизированном плацебо-контролируемом клиническом исследовании, которое мы провели, ивермектин не ускорял клиренс вируса, но снижал концентрацию циркулирующего NS1. 11 Кроме того, мы обнаружили, что ивермектин подавляет ядерный транспорт факторов транскрипции, необходимых для экспрессии шаперонов, включая GRp78 (белок, регулируемый глюкозой 78 кДа), которые поддерживают сворачивание и секрецию NS1. 20 В последующем фармакометрическом клиническом исследовании вирусная нагрузка и профили NS1 были охарактеризованы у детей с инфекцией денге, получавших различные режимы дозирования ивермектина. Целью текущей фармакометрической оценки является использование данных обоих исследований для (1) характеристики фармакокинетических (ФК) свойств ивермектина при острой лихорадке денге, (2) характеристики кинетики вирусной нагрузки и антигенемии NS1 и их детерминант, а также (3) количественной оценки связи между воздействием ивермектина и концентрацией NS1.

...В этом исследовании приняли участие 250 пациентов, из которых 44, 101 и 105 пациентов были случайным образом распределены на группы, которым назначался ивермектин 400 мкг/кг/день один раз в день в течение 2 дней с плацебо на третий день, ивермектин 400 мкг/кг/день один раз в день в течение 3 дней и плацебо один раз в день в течение 3 дней соответственно.

Затем мы провели фармакокинетическое–фармакодинамическое (ФК–ФД) исследование ивермектина у детей, больных лихорадкой денге (NCT03432442, PKIDEN) в больнице Сирирадж в Таиланде. Это было двухфазное клиническое исследование для оценки вирусологического ответа на 400 и 600 мкг/кг/день ивермектина один раз в день, принимаемого в течение 3 дней. Всего 24 ребенка были распределены по четырем группам, по шесть пациентов в каждой из которых были стратифицированы по массе тела для получения 400 мкг/кг/день (первые две группы) или 600 мкг/кг/день (последующие две группы) ежедневной дозы. Эти дети были госпитализированы и имели внутривенную линию для забора крови.

...ингибирование продукции NS1 является полезным, последовательно проводились моделирования различных сценариев дозирования для информирования о сроках, продолжительности и дозе предлагаемого лечения ивермектином, как описано ниже; (1) моделирование первого сценария было выполнено для оптимизации сроков лечения (через 24, 48 и 72 ч после начала лихорадки (на 6-й день после заражения)) при определенном уровне дозы ивермектина (400 мкг/кг/день), (2) на основе результатов первого сценария было проведено моделирование второго сценария для оптимизации продолжительности лечения ивермектином (1 день против 2 дней против 3 дней 400 мкг/кг/день), и (3) на основе результатов второго сценария было проведено моделирование третьего сценария для оптимизации дозы лечения ивермектином (400 против 600 против 800 мкг/кг/день).

Смоделированные профили медианной концентрации NS1 в плазме во времени и процентное снижение NS1 AUC по сравнению с плацебо при различных сценариях дозирования показаны на рисунке  4 и в таблице  3. В целом результаты показали, что снижение NS1 зависело от времени дозирования. Раннее дозирование было необходимо для максимального эффекта. Прогнозируемый профиль NS1 при 3-дневном лечении ивермектином, начатом на 9-й день, не отличался от такового в группе плацебо (рисунок  4a ). Пропорциональное снижение NS1 AUC 0-42 у пациентов, получавших ивермектин через 72 ч после начала лихорадки (9-й день после заражения), было минимальным, тогда как существенное снижение NS1 наблюдалось при раннем лечении ивермектином (например, через 24 ч после начала лихорадки). Это предполагает, что ивермектин следует дозировать в течение 48 ч после начала. Согласно моделированию второго сценария, профиль NS1 (рисунок  4b,c ) и снижение NS1 (таблица  3 ) 3- и 2-дневного лечения ивермектином почти перекрывались, если лечение начиналось на 7-й день (первый день после начала лихорадки). Разница в снижении NS1 между 1-, 2- и 3-дневным лечением ивермектином была минимальной, если лечение начиналось на 8-й день. Это предполагает, что оптимальной продолжительностью лечения было 2-дневное лечение с 7-го дня и 1-дневное лечение с 8-го дня соответственно. Моделирование третьего сценария показало наибольшее снижение NS1 AUC (35,5% при дозировании на 7-й и 8-й дни; 17,7% при дозировании на 8-й день) при дозе ивермектина 800 мкг/кг/день (рисунок  4d–f ; таблица  3 ). Моделирование, проведенное на типичном реципиенте детского возраста, показало схожую картину снижения NS1 с точки зрения профиля NS1, пропорциональное снижение NS1 AUC, как и у типичного взрослого (см. Рисунок  S6 и Таблицу  S5 ).

...снижение NS1 полезно, то если лечение начато между 0 и 24 ч после начала лихорадки, оптимальная доза, как прогнозируется, составит 800 мкг/кг/день в течение 2 дней. Если лечение начато между 24 и 48 ч после начала лихорадки, оптимальная доза составляет 800 мкг/кг, вводимых в виде однократной дозы.

ОБСУЖДЕНИЕ
 Здесь влияние ивермектина на вирусную нагрузку денге и NS1 оценивалось в двух клинических испытаниях на взрослых и детях Таиланда с острой инфекцией денге. Потенциальная противовирусная активность ивермектина оценивалась с помощью PK–PD-моделирования. Динамика заражения вирусом денге у хозяина сложна. 23 Чтобы учесть иммунный ответ хозяина и эффекты лекарств, была разработана математическая модель и подогнана под подробные данные клинических испытаний. Циркулирующий вирус и кинетика NS1 моделировались последовательно, включая как виремию, контролирующую иммунные реакции хозяина, так и ранее задокументированные эффекты воздействия ивермектина на вирусную нагрузку и NS1. Фармакометрический анализ показал, что, хотя ивермектин не оказывал влияния на виремию денге, он снижал воздействие NS1. Это потенциально важно, поскольку NS1 может играть причинную роль в патогенезе тяжелой лихорадки денге. 12Свойства ФК ивермектина при лихорадке денге были в значительной степени аналогичны значениям, о которых сообщалось ранее при других заболеваниях и у здоровых добровольцев27,28 . Ивермектин активно метаболизируется цитохромом P450 CYP3A до трех основных метаболитов у людей29. В этом исследовании свойства ФК ивермектина были адекватно охарактеризованы как у взрослых, так и у детей с острой лихорадкой денге. Единственным значимым ковариатом в модели была общая масса тела. Кажущийся клиренс (CL/F) был в целом сопоставим со значениями, о которых сообщалось ранее у пациентов и здоровых добровольцев, получавших монотерапию ивермектином30-33. Средний конечный период полувыведения составил 94 ч (3,91 дня) у взрослых пациентов с инфекцией денге, что было немного дольше, чем в предыдущих отчетах: 33,2 ч, 32 48,1 ч, 33 и 80,7–90,6 ч. 31 Это может быть частично объяснено ингибированием функции CYP450 при остром лихорадочном заболевании. 34 Другим возможным объяснением более длительного периода полувыведения ивермектина в этом исследовании может быть увеличенный объем распределения из-за сниженных уровней белка в плазме, связанных с острой инфекцией денге. 35 У детей типичный зарегистрированный CL/F составлял 7,4–8,6 л/ч у детей школьного возраста, инфицированных Trichuris trichiura (медианная масса тела 22 кг), получавших 400–600 мкг ивермектина, 36 , 37 что выше, чем наблюдалось в текущем исследовании (4,7 л/ч при масштабировании на ребенка весом 22 кг). Плотность вируса в плазме коррелирует с тяжестью лихорадки денге, 38,39 и цель противовирусных препаратов прямого действия заключается в ослаблении заболевания путем подавления репликации вируса. Пик виремии обычно происходит примерно во время появления симптомов (например, лихорадки), как показано при инфекциях гриппа и COVID-19.40,41 Пик виремии денге появляется параллельно с началом заболевания или очень рано после него (в течение 1 дня болезни).42 В этом исследовании пик вирусной нагрузки не был очевиден у большинства пациентов, и наиболее вероятным объяснением было то, что пациенты были включены в исследование позже после начала заболевания (т. е. примерно через 60 часов после начала лихорадки). После начального плато наблюдалось быстрое снижение виремии, совпадающее с ростом специфических для лихорадки денге IgM и IgG. Эта картина аналогична той, о которой сообщалось ранее. 21 , 22 Важно отметить, что, как показано на примере других самокупирующихся вирусных инфекций (например, гриппа и COVID-19), как только вирусная нагрузка быстро снижается, эффект противовирусного препарата ограничен. 43 Поскольку пик виремии при лихорадке денге обычно приходится на время появления симптомов (лихорадки), а быстрое снижение виремии происходит примерно на четвертый или пятый день по мере роста антител, окно возможностей для эффективного противовирусного препарата узкое. Недавние модели заражения человека лихорадкой денге могут дать представление о том, как лучше понять закономерности роста вируса. 44 Ранее опубликованные отчеты показали, что NS1 играет важную роль в тяжести лихорадки денге. 12 , 13 Препараты-кандидаты, нацеленные на NS1, могут снизить тяжесть инфекции денге, предполагая, что снижение NS1 полезно. Профиль NS1, который мы смоделировали в этом исследовании, имел четкий пик в среднем через 46 часов после начала лихорадки, за которым следовала фаза медленного спада. Клиренс NS1 из плазмы был существенно медленнее, чем у виремии. Если NS1 является истинной мишенью препарата, то эти результаты предполагают, что лечение, нацеленное на выработку NS1, следует проводить в течение 2 дней с начала заболевания. Этот анализ PK–PD продемонстрировал значительную связь между воздействием ивермектина и снижением NS1. Неясно, как работает ивермектин и почему его воздействие на NS1 отличается от воздействия на виремию. Что касается механизма действия, ивермектин может влиять на активность геликазы NS3 при репликации флавивируса in vitro. 19 Действие ивермектина на NS3 и NS5, два основных фермента, необходимых для репликации вируса, 19 , 45 может привести непосредственно к снижению продукции и секреции NS1. Но точный механизм, посредством которого ивермектин снижает уровни NS1, и происходит ли это конкретно через прямое вмешательство в процессы созревания и секреции NS1, независимо от репликации вируса, остается неясным и требует дальнейшего изучения. Остается возможным, что ивермектин действительно обладает слабой прямой противовирусной активностью in vivo, но что чувствительность для обнаружения этого по быстро снижающемуся профилю виремии меньше, чем требуется для обнаружения связанных с препаратом изменений в NS1, который выводится медленнее. Очевидно, что необходимы дальнейшие исследования для подтверждения этих различных выводов и гипотез. Согласно моделированию, предложенная доза 800 мкг/кг/день привела к гораздо большему снижению NS1, чем доза 400 мкг/кг/день (на 7, 8 день: 35,5% против 23,3%; на 8 день: 17,7% против 11,0%). Однако высокая доза ивермектина (800 мкг/кг/день) не была оценена в двух клинических испытаниях. Безопасность высокой дозы ивермектина (600 и 800 мкг/кг/день) требует дальнейшей оценки у пациентов с лихорадкой денге, хотя эта доза была продемонстрирована как безопасная в некоторых антипаразитарных клинических испытаниях у взрослых. 46 , 47 Профиль безопасности высоких доз ивермектина (600 и 800 мкг/кг/день) не был адекватно оценен у детей, хотя в этом небольшом клиническом исследовании с участием детей не было выявлено никаких существенных сигналов безопасности, связанных с дозой 600 мкг/кг/день.
Четыре различных серотипа вируса денге и различные модели предыдущего воздействия (и, следовательно, иммунитета) создают существенное разнообразие в вирусной динамике хозяина. В этом исследовании инфекции серотипа 1 имели более высокие скорости производства вируса, что приводило к более высоким вирусным нагрузкам, чем при серотипах 2 и 4. Напротив, инфекции серотипа 3 имели относительно более низкие вирусные нагрузки. Некоторые предыдущие исследования предполагали, что у пациентов с первичными инфекциями вирусные нагрузки выше 48 , 49 ; но мы не обнаружили этого в текущем исследовании. Кроме того, мы обнаружили, что секреция и элиминация NS1 значительно медленнее во время первичной инфекции. Это было связано с низкими уровнями специфичных для NS1 IgG, что приводило к более плоским профилям NS1 по сравнению со вторичными инфекциями. Этот результат моделирования позволяет механистически интерпретировать высокие уровни NS1 в других клинических исследованиях. 48Мы наблюдали более высокую вирусную нагрузку и более низкие уровни NS1 у детей по сравнению со взрослыми пациентами. Анализ моделирования показал, что у детей были более низкие показатели гибели инфекционных клеток и более высокий базовый клиренс NS1. Однако механизм этого не был ясен. Это может быть связано с различным паттерном иммунитета хозяина у детей, например, с ответом IgM у детей, который был выше, чем у взрослых пациентов, как показано в текущем исследовании (например, уровень IgM на 5-й день после начала заболевания, 877 против 54 U/L).
Наше исследование имеет несколько ключевых ограничений: ... Немногие пациенты были включены в исследование в течение 24 часов после начала лихорадки, что может повлиять на моделирование фазы роста вирусной нагрузки и NS1. Более механистическая количественная системная фармакологическая модель (QSP) может быть полезна для дальнейшего изучения и характеристики вирусной нагрузки, профилей иммунитета хозяина и их взаимодействий. (3) Поскольку у каждого пациента было только одно измерение специфичных для NS1 антител на 5-й день после лихорадки, полный профиль концентрации NS1 во времени не мог быть смоделирован, и динамические эффекты этого антитела на клиренс NS1 не были дополнительно исследованы. (4) В исследовании ФК–ПД у детей не планировалось группы плацебо, поэтому предполагалось, что эффекты ивермектина на вирусную нагрузку и профили NS1 у детей будут такими же, как у взрослых пациентов. (5) Были зарегистрированы различия в вирусной нагрузке лихорадки денге между типами инфекции и серотипами. 50 Однако было бы сложно сделать такой вывод в ковариативном анализе, учитывая небольшое количество первичной инфекции лихорадки денге каждым серотипом, пропущенное время заражения или низкие профили вирусной нагрузки. (6) Модель сложна, и несколько параметров не поддаются идентификации. Она хорошо соответствовала данным, но это не значит, что она верна. Необходимы дальнейшие исследования для подтверждения или опровержения этих результатов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Кинетические свойства ивермектина, вирусной нагрузки денге и NS1 были адекватно описаны у взрослых и детей с острой лихорадкой денге. Ивермектин был связан с зависимым от концентрации снижением концентрации NS1 в плазме. Представленная здесь модель денге в организме хозяина может быть полезным инструментом для оценки эффектов препарата при разработке противовирусных препаратов для лихорадки денге.

https://ascpt.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/psp4.13233

Спасибо всем, кто находит этот пост полезным. Подпишитесь на т/к «Так победим! Статьи»

Учитывая возросший интерес к статинам добавил три ссылки в конце. Дополнительную информацию можно получить если воспользоваться функцией «поиска» у меня в ЖЖ.

Примечание: Все сокращение, замены и др. выполнены автором блога и не имеют никакого отношения к публикациям.(обычно в начале публикации и в заголовке). Сделано это по причине цензуры в некоторых соцсетях, которые борются с любым упоминаем ранней терапии и соответствующих лекарств.(в них идет скрин из т/к)

Отказ от ответственности: я не защищаю читателей, употребляющих иве или какие-либо другие препараты. Я не врач, а биохимик по образованию и никому не даю медицинских советов. Прежде чем принимать какие-либо лекарства, всегда консультируйтесь с лечащим врачом, которому доверяете.

ПОМНИТЕ. Вы находитесь под защитой Нюрнбергского кодекса и Хельсинской декларации. Хельсинкская декларация делает центральным документом этической исследовательской деятельности информированное согласие. Декларация определяет не только приемлемость известных и исследованных методов лечения, но принципы лечения больного альтернативными методами, к примеру, параграф 37 призван регулировать случаи, «когда не существует проверенного профилактического, диагностического или терапевтического метода. Когда существующие методы оказываются неэффективными, врач, получив обоснованное согласие пациента, должен иметь право применять непроверенные или новые профилактические, диагностические и терапевтические меры, если, по его мнению, они дают надежду на спасение жизни, восстановление здоровья или могут облегчить страдания. По мере возможности такие меры должны быть исследованы на предмет их безопасности и эффективности. Во всех случаях всю новую информацию следует регистрировать и, при необходимости, публиковать».

Полный текст ХД: https://budetlyanin108.livejournal.com/3489319.html

Подписывайтесь на мою страницу, всегда последние РКИ, КИ, обзор мировой прессы, статьи и рекомендации о передовых методах лечения К19 : https://www.facebook.com/veniamin.zaycev/

Здесь собрано все, что будет вам интересно, все объяснено в закрепленном посте, там же есть и схема-таблица с алгоритмом и применении иве:
https://www.facebook.com/ashominfo

Группа в фб «Так победим!» все вопросы по иве и ранней терапии:
https://www.facebook.com/groups/293522279068895

Телеграм-канал «Так победим!» на случай потери связи, там публикуется то, что идет в ЖЖ и не всегда идет в ФБ:
https://t.me/takpobedimsvz

Чат по иве в телеграме:
https://t.me/takpobedi

ЖЖ: https://budetlyanin108.livejournal.com/

"Книга отзывов"

часть 1: https://budetlyanin108.livejournal.com/3118230.html

часть 2: https://budetlyanin108.livejournal.com/3118949.html

часть 3: https://budetlyanin108.livejournal.com/3211902.html

часть 4: https://budetlyanin108.livejournal.com/3417765.html

Ссылки по детоксикации спайк-белка:

https://budetlyanin108.livejournal.com/3144742.html

https://budetlyanin108.livejournal.com/3260643.html

https://budetlyanin108.livejournal.com/3596796.html

Детокс аутофагией:

https://budetlyanin108.livejournal.com/3613550.html

Протокол др. Питера Маккалоу:

https://budetlyanin108.livejournal.com/3601347.html

Назальные спреи

https://budetlyanin108.livejournal.com/3612201.html

РУБРИКАТОР чата Телеграм-канала «Так победим!»

Обзор противоопухолевых свойств перепрофилированных препаратов

В связи с тем, что участились просьбы дать ссылки на научные статьи и исследования по применению тех или иных перепрофилированных препаратов против рака, сделал этот пост на основе публикаций в моем ЖЖ. Возможно всё не удастся втиснуть в один пост из-за ограничений по количеству знаков (лимит 80К знаков), но можно будет воспользоваться «поиском» у меня в ЖЖ по ключевым словам для получения дополнительной информации.

https://budetlyanin108.livejournal.com/3655521.html
Обновление по дозировкам фенбендазола при раке от Др. У.Макиса:
https://budetlyanin108.livejournal.com/3758501.html?newpost=1

О СТАТИНАХ

Чем заменить статины
https://budetlyanin108.livejournal.com/3666513.html

Прежде чем принимать статины...
https://budetlyanin108.livejournal.com/3691623.html

СТАТИНЫ — величайший обман человечества
https://budetlyanin108.livejournal.com/3604461.html

Оставить комментарий

Популярные посты:

lana_ustinov

Кульмбах, крепость Плассенбург, орнаменты и русский авангард

l_boris

Сегодня

sheynefros

Для любителей неопознанных басен

colonelcassad

Сербские братушки

matsam

Утреннее

gelio

Челябинск — столица Южного Урала

matsam

Вечернее

antialle

Не торопитесь. В жизни есть вещи поважнее, чем всё успеть.

• Ранее
• Архив